الفم سرطان الخلايا الحرشفية في الفئران / الإناث

معلومات أساسية

اسم الخليةسالفم سرطان الخلايا الحرشفية ، OSCC

خط الخليةسC57BL / 6 Cxcr3 - / -

مصدر الخليةسخارج البلاد

تحديد الخلاياسشارع التوثيق قد مرت

شكل الخليةسlymphoblastoid الخلايا المتعددة الأضلاع ، ملتصقة + تعليق النمو

الثقافة المتوسطةسdmem ( بما في ذلك nahco3 1.5g / l ) ( basmed-aw-013 ) + FBS 10 ٪ + P / S1 ٪ 500 مل متوسطة : imdm : F10 / F12 = 2 : 1313ml : 157ml متوسطة + FBS10 ( 50 مل ) + 2.5mg / 500ml الأنسولين + 20 ميكروغرام / 500ml + 2.5ug / 500ml EGF + ع / ق 1 ٪ مزدوجة المقاومة .

حالة ثقافةسالمرحلة الغازية : الهواء ، 95 ٪ ؛ ثاني أكسيد الكربون درجة الحرارة : 37 درجة مئوية ، الرطوبة حاضنة 70 ٪ - 80%

خلفية الخليةسالفم سرطان الخلايا الحرشفية ( OSCC ) هو مجموعة فرعية بارزة من سرطان الرأس والعنق . عوامل الخطر الرئيسية OSCC هي التعرض للمواد المسرطنة التي تميز هذه المجموعة الفرعية من سرطان الرأس والعنق من سرطان الرأس والعنق الناجم عن فيروس الورم الحليمي البشري . على الرغم من التقدم المحرز في الكشف عن الجراحة والعلاج الكيميائي والعلاج الإشعاعي ، والتشخيص OSCC ظلت مستقرة على مدى عقود . وبالإضافة إلى ذلك ، عند التشخيص ، ما يقرب من ثلثي المرضى OSCC يعانون من الأمراض المتقدمة محليا ، مما يؤدي إلى زيادة معدلات الاعتلال والوفيات .

استخدام الخلايا : لأغراض البحث العلمي فقط

ملاحظة

1 . moc1 خلية نشطة للغاية ، وارتفاع معدل النمو ، وليس من المستحسن أن كثافة كبيرة جدا من مرور ، ولكن اختيار عدد قليل جدا من إعادة تمهيد ، تساوي طول 80 ٪ أو نحو ذلك من مرور الوقت ، من الصعب هضم ، اقترح إضافة 0.25 ٪ EDTA مختلطة تماما بعد جميع الخلايا في اتصال ، وضعت في حاضنة الهضم ، حوالي 3-4 دقائق بعد أخذ

2 - الضرب على الجانب من وعاء الثقافة للمساعدة في تقشير الخلايا ، عملية الضرب سوف تستمر حوالي 2 دقيقة قبل تقشير معظم الخلايا ، إذا كانت نسبة تقشير ليست كثيرة ، يمكن أيضا إعادة وضعها في حاضنة الهضم المستمر 1-2 دقيقة بعد أن التقط مرة أخرى ، مثل 80-90 ٪ من الخلايا بعد تقشير ، ثم وقف الهضم ، الطرد المركزي إعادة تعليق إعادة نشر زجاجات ، موزعة بالتساوي .

3 - التصاق الخلايا moc2 ليست قوية مثل الخلايا التقليدية . دورة الضرب ليست سريعة كما moc1 . . . . . . . طرق الهضم التقليدية المستخدمة .

درجة الحرارة العادية التسليم

بعد تلقي T25 زجاجة تعقيم ، ثم وضع حاضنة لمدة 2-3 ساعات ، ثم لاحظ كثافة و حالة التقاط 2-3 صور التغذية المرتدة إلى المبيعات ، يمكن تمرير الكثافة القياسية . في وقت مبكر من مرور نسبة 1 : 2 ، ثم بعد مرور كامل مرة أخرى ، فمن المستحسن للحفاظ على زجاجة كاملة في 1 مل تجميد أنبوب ، زجاجة أخرى تواصل مرور 2-3 بعد تكرار التجميد قبل التضخيم ، وذلك لمنع حالات الطوارئ الناجمة عن قطع البذور .

الثلج الجاف الشحنعندما فشل الانتعاش الأول ، ونحن سوف تتبع بدقة متطلبات الشركة المصنعة الانتعاش الثاني ، ونحن سوف تبقي على الفور صور الانتعاش إذا لم تنجح .

خلية ملتصقة

1 - إزالة طاف ، وغسل الخلايا مع برنامج تلفزيوني بدون أيونات الكالسيوم والمغنيسيوم 1-2 مرات .

2 - إضافة 0.25 في المائة ( ث / ت ) - 0.53 ملم EDTA في قارورة ( T25 1-2ml ، T75 2-3ml ) و يهضم في 37 ℃ لمدة 1-2 دقيقة ( عسر الهضم الخلايا يمكن أن تطيل فترة الهضم بشكل صحيح ) ، ثم لاحظ تحت المجهر ، إذا كان معظم الخلايا تصبح مستديرة و تقشر ، تأخذ مرة أخرى إلى طاولة العمليات بسرعة .

3 - ضخ بلطف ، الطرد المركزي في 1000 دورة في الدقيقة لمدة 3-5 دقائق ، تجاهل طاف ، إضافة 1-2 مل متوسطة الثقافة ثم تهب بالتساوي . تعليق خلية تم تقسيمها إلى 5 زجاجات / 6 سم طبق بتري حسب نسبة 1 : 2 ، 6-8 مل من وسائل الإعلام الجديدة أضيفت إلى الحفاظ على نمو الخلايا وحيويتها .

4 - تجميد الخلايا : بعد تلقي الخلايا ، فمن المستحسن للحفاظ على مجموعة من البذور في أول 3 أجيال من الثقافة لاستخدامها في التجارب اللاحقة .

5 - وسائل الإعلام المستخدمة في النقل ( الري ) لا يمكن استخدامها في زراعة الخلايا ، يرجى استبدال وسائل الإعلام الجديدة التي أعدت وفقا لشروط تعليمات زراعة الخلايا .

تعليق خلية

الخلايا التي تنمو في تعليق يمكن الحفاظ على نمو الخلايا عن طريق إضافة وسائل الإعلام إلى الثقافة قارورة . في العام ، كثافة الخلايا يمكن الحفاظ عليها في 1 × 10 × 10 ⁵ 1 ⁶ / مل ( خلايا مختلفة تتطلب كثافة مختلفة ) للحفاظ على نمو الخلايا الطبيعية . إذا لزم الأمر ، تعليق خلية يمكن جمعها في أنبوب الطرد المركزي 1000 دورة في الدقيقة ، الطرد المركزي لمدة 5 دقائق ، إزالة طاف ، إضافة 1-2 مل من الثقافة المتوسطة ، ثم تعليق خلية يمكن تقسيمها إلى زجاجة جديدة T25 حسب نسبة 1 : 2 ، إضافة 6-8 مل من الثقافة الجديدة المتوسطة وفقا لمتطلبات المواصفات للحفاظ على نمو الخلايا وحيوية .

السلامة البيولوجية

1 - جميع الخلايا الحيوانية تعتبر خطرة بيولوجيا ، يجب أن تعمل في المرحلة الثانية من السلامة البيولوجية منصة . يرجى ملاحظة أن جميع النفايات السائلة والأواني التي تأتي في اتصال مع هذه الخلايا يجب أن تكون معقمة قبل التخلص منها .

2 - ينصح دائما استخدام القفازات الواقية ، والملابس الواقية أقنعة الوجه عند استعادة الخلايا المجمدة . ملاحظة : تجميد الأنابيب المغمورة في النيتروجين السائل سوف تتسرب ، وسوف ببطء ملء النيتروجين السائل . عندما يذوب النيتروجين السائل في مرحلة الغاز يمكن أن يؤدي إلى انفجار السفينة أو ضربة قبالة غطاء مع قوة خطيرة ، مما أدى إلى ارتفاع الحطام ، مما تسبب في أضرار بشرية .