moc1 خط الخلية

معلومات أساسية

اسم الخلية :moc1 خط الخلية

T150 قارورة : 07-200-64

T75 قارورة : 10-126-37

المبردات : 03-374-059

45um فلتر : 09-754-21

الخطوط الطيفية : moc1 خامل

خط العدوانية : MOC2

IMDM : sh30228.02 لحم

خليط من المغذيات f10-f12 : sh30026.01 مصل بقري جنيني

رقم الدليل / الدفعة : SH30071.03 / AWK24001

مرشح زجاجة فلتر : 09-761-108

الأنسولين : I6634-50mg

عامل نمو البشرة ( لو ) ، المؤتلف الإنسان 01-107

moc1 خط الخلية

ذوبان خط الخلية

1 . إضافة 21 مل imdm وزارة التجارة خط متوسطة إلى t150 قبل ذوبان الجليد ( إذا كنت تريد أن تذوب في t75 ، إضافة 10 مل إلى t75 ) .2 - إزالة النيتروجين السائل من زجاجة التبريد ، رش زجاجة تحتوي على 70 ٪ من الكحول لتنظيف .

3 - وضع الجزء السفلي من زجاجة التبريد في حمام مائي في 37 درجة مئوية ( لا تدع غطاء الاتصال المياه لتجنب التلوث ) ، حتى قطعة صغيرة من الجليد العائمة .

4 - رش زجاجة التبريد مرة أخرى مع ETOH ووضعها على غطاء محرك السيارة . 1 مل ماصة أضيفت إلى 1 مل من الخلايا ، و 2 مل أضيفت إلى T150 التي تحتوي بالفعل على وسائل الإعلام ( T150 مجموع 22 مل ) .

5 - تأخذ بعض وسائل الإعلام من t150 قارورة ، شطف قارورة ، ثم وضعها في لوحة مسطحة لضمان أن جميع الخلايا المتبقية في قارورة .

خطوط الخلايا المجمدة
1 . جمع الخلايا من T150

2 . تدوير الجسيمات في أنبوب مخروطي 15ml ( 1000 دورة في الدقيقة × 5 دقائق )

3 - تصريف طاف

4 . انقر على أنبوب مخروطي 15ml ، تعليق خلية

5 - إضافة 1.5ml imdm متوسطة الثقافة ، وإعادة بناء الخلايا والحفاظ على الجليد في الثقافة المتوسطة .

6 - إضافة 1.5 مل من تجميد المتوسطة ( 20 ٪ DMSO ) في imdm وزارة التجارة خط متوسطة . على سبيل المثال : 20ml المخزون - إضافة 16ml imdm وزارة التجارة خط متوسطة و 4ml DMSO . . . . . . . حاقن فلتر ، فلتر باستخدام ام

7 - 1 مل إلى 3 زجاجات التبريد لكل حصة

8 - تخزين في - 80 درجة مئوية لمدة لا تتجاوز أسبوعين

9 - وضع النيتروجين السائل في 1-2 أسابيع

ملاحظة :إذا لزم الأمر ، يمكن أن تضاف إلى 2 مل imdm و 2 مل تجميد وسائل الإعلام للتخزين في 4 زجاجات . وبالإضافة إلى ذلك ، فمن الأفضل أن عد الخلايا قبل أن يتم تجميد الخلايا وتسجيلها في قارورة .