hep-53.4 الماوس خلايا سرطان الكبد

معلومات أساسية

اسم الخليةسhep-53.4 الماوس خلايا سرطان الكبد

خلية الاسم المستعارسHEP-53.4 ; 53-4 ؛ الماوس خلايا السرطان

مصدر الخليةسألمانيا

تحديد الخلاياسشارع التوثيق قد مرت

شكل الخليةسepithelioid خلية التصاق النمو

قاعدة الثقافةسdmem ( مع nahco3 1.5g / l ) ( basmed-aw-013 ) + 10 ٪ من سلاح + ع / س 1 ٪

حالة ثقافةسالمرحلة الغازية : الهواء ، 95 ٪ ؛ ثاني أكسيد الكربون درجة الحرارة : 37 درجة مئوية ، الرطوبة حاضنة 70 ٪ - 80%

حالة التجميدسالمصل خالية من السوائل المجمدة ، النيتروجين السائل التخزين

خلفية الخليةسسرطان الكبد الأولية من c57bl / 6j الفئران ، والتي تمثل بصدق سرطان الكبد ، ويقدم نماذج قيمة لدراسة هذا النوع من سرطان الكبد ، مرادفات hep-53.4 و 53.4 ، والتي يمكن التعرف عليها بسهولة ونقلها . سرطان الكبد هو مشكلة صحية كبيرة ، والتي يمكن أن توفر معلومات دقيقة عن المسارات الجزيئية ، وتفاعلات الخلايا ، واستراتيجيات العلاج ، والتي نشأت من musculus ( نموذج الفأر من سرطان الكبد ذات الصلة وطرق العلاج ) .

استخدام الخلاياسلأغراض البحث العلمي فقط

خلية شحن : بقعة ، حوالي 1 أسبوع

ملاحظة

1 . الطرد المركزي من الخلايا التي تم جمعها من قبل الهضم الروتيني .

2 - إزالة طاف من أنبوب الطرد المركزي بعد الطرد المركزي ، إضافة حوالي 1 مل من تعليق الخلايا ، خلط ، أقترح أن تهز بلطف أو ضربة بلطف الخلايا ، ووضعها في حاضنة الهضم ، ثم هضم حوالي 1 دقيقة .

3 - بعد الهضم ، بلطف ضربة تعليق خلية مع ماصة بندقية ، مما يجعل الخلايا مشتتة ، بسرعة إضافة 3-5ml المصل تحتوي على وسائل الإعلام مختلطة لوقف الهضم ، الطرد المركزي إزالة .

4 - إضافة 5 مل أو نحو ذلك من الخلايا في الثقافة المتوسطة المقابلة مختلطة بالتساوي ، في نسبة إلى الثقافة زجاجة / طبق .

5 . إذا كان هناك عدد قليل من مجموعات من الخلايا الصغيرة التي لا تحتاج إلى إعادة هضم ، ثم أنها سوف تختفي بعد أن تصبح الخلايا مستقرة .

درجة الحرارة العادية التسليم

بعد تلقي T25 زجاجة تعقيم ، ثم وضع حاضنة لمدة 2-3 ساعات ، ثم لاحظ كثافة و حالة التقاط 2-3 صور التغذية المرتدة إلى المبيعات ، يمكن تمرير الكثافة القياسية . في وقت مبكر من مرور نسبة 1 : 2 ، ثم بعد مرور كامل مرة أخرى ، فمن المستحسن للحفاظ على زجاجة كاملة في 1 مل تجميد أنبوب ، زجاجة أخرى تواصل مرور 2-3 بعد تكرار التجميد قبل التضخيم ، وذلك لمنع حالات الطوارئ الناجمة عن قطع البذور .

الثلج الجاف الشحنعندما فشل الانتعاش الأول ، ونحن سوف تتبع بدقة متطلبات الشركة المصنعة الانتعاش الثاني ، ونحن سوف تبقي على الفور صور الانتعاش إذا لم تنجح .

hep-53.4 الماوس خلايا سرطان الكبد

خلية ملتصقة

1 - إزالة طاف ، وغسل الخلايا مع برنامج تلفزيوني بدون أيونات الكالسيوم والمغنيسيوم 1-2 مرات .

2 - إضافة 0.25 في المائة ( ث / ت ) 0.53 ملم EDTA في الثقافة زجاجة ( T25 زجاجة 1-2ml ، T75 زجاجة 2-3ml ) في 37 ℃ حاضنة الهضم لمدة 1-2 دقيقة ( عسر الهضم الخلايا يمكن أن تطيل فترة الهضم بشكل صحيح ) ، ثم لاحظ تحت المجهر ، إذا كان معظم الخلايا تصبح مستديرة و تقشر قبالة ، بسرعة العودة إلى طاولة العمليات ، اضغط على عدة مرات ، إضافة 3-4ml تحتوي على 10 ٪ FBS الثقافة المتوسطة لإنهاء عملية الهضم .

3 - ضخ بلطف ، الطرد المركزي في 1000 دورة في الدقيقة لمدة 3-5 دقائق ، تجاهل طاف ، إضافة 1-2 مل متوسطة الثقافة ثم تهب بالتساوي . تعليق خلية تم تقسيمها إلى 5 زجاجات / 6 سم طبق بتري حسب نسبة 1 : 2 ، 6-8 مل من وسائل الإعلام الجديدة أضيفت إلى الحفاظ على نمو الخلايا وحيويتها .

4 - تجميد الخلايا : بعد تلقي الخلايا ، فمن المستحسن للحفاظ على مجموعة من البذور في أول 3 أجيال من الثقافة لاستخدامها في التجارب اللاحقة .

5 - وسائل الإعلام المستخدمة في النقل ( الري ) لا يمكن استخدامها في زراعة الخلايا ، يرجى استبدال وسائل الإعلام الجديدة التي أعدت وفقا لشروط تعليمات زراعة الخلايا .

تعليق خلية

الخلايا التي تنمو في تعليق يمكن الحفاظ على نمو الخلايا عن طريق إضافة وسائل الإعلام إلى الثقافة قارورة . في العام ، كثافة الخلايا يمكن الحفاظ عليها في 1 × 10 × 10 ⁵ 1 ⁶ / مل ( خلايا مختلفة تتطلب كثافة مختلفة ) للحفاظ على نمو الخلايا الطبيعية . إذا لزم الأمر ، تعليق خلية يمكن جمعها في أنبوب الطرد المركزي 1000 دورة في الدقيقة ، الطرد المركزي لمدة 5 دقائق ، إزالة طاف ، إضافة 1-2 مل من الثقافة المتوسطة ، ثم تعليق خلية يمكن تقسيمها إلى زجاجة جديدة T25 حسب نسبة 1 : 2 ، إضافة 6-8 مل من الثقافة الجديدة المتوسطة وفقا لمتطلبات المواصفات للحفاظ على نمو الخلايا وحيوية .

شكل النقل

انخفاض درجة الحرارة : 1 مل تجميد تخزين حزمة الجليد الجاف النقل ، بعد تلقي - 80 درجة الثلاجة بين عشية وضحاها ، ونقل إلى النيتروجين السائل أو الانتعاش المباشر ، إذا كان الثلج الجاف قد تبخرت نظيفة ، تجميد تخزين غطاء زجاجة قبالة ، تلف الخلايا الملوثة ، يرجى الاتصال بنا على الفور .

درجة الحرارة العادية : T25 زجاجات من الخلايا الحية التي تم استردادها يتم شحنها في درجة الحرارة العادية ، بعد تلقي الخلايا وفقا لطريقة المعالجة .

السلامة البيولوجية

1 - جميع الخلايا الحيوانية تعتبر خطرة بيولوجيا ، يجب أن تعمل في المرحلة الثانية من السلامة البيولوجية منصة . يرجى ملاحظة أن جميع النفايات السائلة والأواني التي تأتي في اتصال مع هذه الخلايا يجب أن تكون معقمة قبل التخلص منها .

2 - ينصح دائما استخدام القفازات الواقية ، والملابس الواقية أقنعة الوجه عند استعادة الخلايا المجمدة . ملاحظة : تجميد الأنابيب المغمورة في النيتروجين السائل سوف تتسرب ، وسوف ببطء ملء النيتروجين السائل . عندما يذوب النيتروجين السائل في مرحلة الغاز يمكن أن يؤدي إلى انفجار السفينة أو ضربة قبالة غطاء مع قوة خطيرة ، مما أدى إلى ارتفاع الحطام ، مما تسبب في أضرار بشرية .

اهتمام خاص

معظم dmem تحتوي على تركيزات عالية من nahco3 ( 3.7g / l ) . إذا dmem ( 3.7g / l nahco3 ) المستخدمة في زراعة الخلايا ، تركيز ثاني أكسيد الكربون ( 7 ٪ - 10 ٪ ) .