الماوس الميوجلوبين ، ميو / ميغابايت إليسا كيت

( 1 ) 100 μ 1 تضاف إلى كل حفرة من العينة التي سيتم اختبارها ، كل عينة يتم توفيرها مع ثلاثة ثقوب موازية . اثنين من السيطرة السلبية الثقوب ، كل ثقب زائد غير المعالجة

انقسام الخلية حل المجموعة 100 μ 1 ؛ وبالإضافة إلى ذلك ، فارغة السيطرة على ثقب المضافة مع 100

( 2 ) وضع علامة الانزيم لوحة في 4 ℃ وتغليف بين عشية وضحاها .

( 3 ) غسل لوحة : رد فعل السائل في حفرة جافة يتم امتصاصه ، وغسلها مرة أخرى مع غسل السائل ( بعد غسل السائل هو شغلها مع لوحة حفرة ، ثم قذف بعيدا ) ، ثم غسل السائل هو شغلها مع لوحة .

حفرة ، نقع لمدة 1-2 دقيقة ، اهتز بشكل متقطع . بعد قذف السائل في حفرة ، بات الجافة على ورقة ماصة . كرر الغسيل 3-4 مرات .

( 4 ) pbs50 μ 1 أضيفت إلى السيطرة السلبية المسام ، و 1 : 500 مخففة السائل العامل 50 μ 1 أضيفت إلى عينة فارغة المسام المسام .

( 5 ) انزيم المسمى لوحة وضعت في مربع الرطب في 37 ℃ حاضنة الحضانة لمدة 60 دقيقة .

( 6 ) غسل لوحة ، مع ( 4 ) .

( 7 ) إضافة 1 : 5000 تمييع HRP المسمى الماعز الأجسام المضادة المناعية 100 μ 1 في المسام .

( 8 ) انزيم المسمى لوحة وضعت في مربع الرطب في 37 ℃ حاضنة الحضانة لمدة 60 دقيقة .

( 9 ) غسل لوحة ، مع ( 4 ) .

( 10 ) 100 μ 1 TMB لون السائل أضيفت إلى كل مسام ، مختلطة بلطف لمدة 10 ثوان ، ثم وضعت في مكان مظلم في 37 ℃ لمدة 15-20 دقيقة .

( 11 ) 100 μ 12mo1 / lh2s04 أضيفت إلى كل مسام .

( 12 ) امتصاص الضوء القيم V1 و 630nm V2 تقاس على التوالي في 450nm ، وأخيرا قياس قيمة 0 د هو الفرق بينهما ( v1-v2 ) .

تدخل الضوء الناجم عن الخدوش أو بصمات الأصابع .

( 13 ) معالجة البيانات : تحسب قيمة س / ن بعد الحصول على قيمة المواد المستنفدة للأوزون في العينة ( ق ) وعلى النقيض السلبي ( ن ) . ق / ن > 2-1 هو معيار إيجابي .