من أجل تحسين كفاءة الاسترداد التقليدية ، بالإضافة إلى تحسين نظام رد الفعل و التمهيدي تصميم ، ونحن بحاجة أيضا إلى إيلاء الاهتمام إلى تحسين إجراءات التضخيم . وفيما يلي بعض الاستراتيجيات الرئيسية :

تحديد درجة حرارة التخمير الأمثل التدرج PCR
الصلب درجة الحرارة أمر بالغ الأهمية من أجل تضخيم خصوصية . درجة حرارة التخمير يمكن فرزهم بسرعة عن طريق التدرج PCR ( على سبيل المثال ، التدرج من 50 درجة مئوية إلى 65 درجة مئوية ) لتجنب عدم التحديد أو التضخيم . إذا كان هناك فرق كبير في الاشعال TM ، ونحن يمكن أن محاولة " لمس أسفل PCR " ، وهذا هو ، وانخفاض درجة حرارة التخمير من درجة حرارة عالية ، وإعطاء الأولوية لتضخيم منتجات محددة للغاية .

2 - تحسين دورة المعلمات
- predenaturation الوقت : عالية ع محتوى القالب ، يمكن أن تمتد إلى 5-10 دقائق الأولي لمسخ ، لضمان أن الحمض النووي حبلا .
- تمديد الوقت : تعديل وفقا لطول جزء تضخيمها ( عادة 1 كيلو بايت / دقيقة ) ، ولكن لاحظ الفرق في نشاط انزيم . على سبيل المثال ، عالية الدقة الانزيمات قد يستغرق وقتا أطول .
- عدد الدورات : دورات للتوصيات 25-35 بشأن التضخيم الروتيني . الإفراط في التداول يمكن أن تزيد من خطر ديمر التمهيدي ، ويمكن تحقيق التوازن بين الحساسية والدقة من خلال تخفيف القالب أو تقليل عدد الدورات .

3 - استخدام إضافات
- DMSO أو البيتين : يمكن أن تخفف من آثار الهياكل الثانوية المعقدة ، ولا سيما للاستخدام في قوالب طويلة أو عالية ع ( التركيزات النهائية الموصى بها 3-5 في المائة ) .
- مغ ۸ ⁺ التركيز الأمثل : مغ ۸ ⁺ هو العامل المساعد طق الانزيم ، وتركيز ( عادة 1.5-2.5mm ) يجب أن تكون متوازنة مع dntps . . . . . . . أفضل تركيز يمكن تحديده من خلال التدرج اختبار 0.5mm الفاصلة .

4 . قالب نوعية وكمية
تجنب استخدام قوالب تحتوي على مثبطات تدهور أو . . . . . . . إذا كانت العينة البيئية الحمض النووي ، المعالجة خطوة ( مثل العمود تنقية ) يمكن إضافتها . حجم القالب المقترح بين 1 و 100 نانوغرام ، الكثير قد يؤدي إلى التضخيم غير محددة ، صغيرة جدا ، تحتاج إلى زيادة عدد الدورات .

5 - إعدادات التحكم
وتشمل الضوابط الإيجابية ( المعروفة قوالب ) ، سلبية الضوابط ( بدون قوالب ) و الضوابط الداخلية ( على سبيل المثال ، بتلر الجينات ) من أجل القضاء على التلوث كاشف أو خلل في النظام .