بطة الكبد الخلايا الجذعية الوسيطة

خلية مقدمة :

الكبد الجذعية الوسيطة بطة الجنين معزولة من أنسجة الكبد الجنينية . الكبد هو الجهاز الرئيسي في الجسم مع وظيفة التمثيل الغذائي ، و يلعب دورا في إزالة الأكسدة ، وتخزين السكر في الكبد ، تخليق البروتين إفرازي ، وهلم جرا . الكبد أيضا يجعل الصفراء في الجهاز الهضمي . الكبد هو جهاز كبير في أحشاء الجسم ، وتقع في منطقة البطن من الجسم ، تحت حق الحاجز ، في نهاية الجبهة من المرارة أمام الكلى اليمنى ، فوق المعدة . الكبد هو الغدد الهضمية الكبيرة في الجهاز الهضمي .الخامسمتعرج الجهاز . الكبد هو الجهاز الرئيسي في تخليق اليوريا ، وهو أيضا جهاز مهم في عملية التمثيل الغذائي . الخلايا الجذعية الوسيطة )ماجستيرهو نوع من الخلايا الجذعية عالية التجديد الذاتي و multipotential التمايز . في ظل ظروف مختلفة ، يمكن أن تفرق في الخلايا المكونة للدم في الأنسجة المختلفة من الخلايا المكونة للدم ، ولها وظائف دعم النظام المناعي ، وإصلاح الأنسجة ، وهلم جرا . الخلايا الجذعية الوسيطة )MSCsهو نوع من الخلايا الجذعية البالغة مع التجديد الذاتي و multipotential التمايز ، التي توجد في نخاع العظم ، الأنسجة الدهنية ، دم الحبل السري ، والعديد من أنواع الأنسجة الجنينية . يمكن أن تفرز العديد من السيتوكينات وعوامل النمو ، وتعزيز الخلايا الجذعية المكونة للدم )HSCتكاثر وتمايزMSCsكما أن لديها وظائف المناعة ، المضادة للالتهابات ، وإصلاح الأنسجة ، والتي يمكن أن تقلل من مرض الطعم ضد المضيف )GVHDوغيرها من مضاعفات زرع . خلايا الكبد الجنينية غير متنيماجستيرو كمية كبيرة ، يمكن أن تصبح البذور الخلايا .

طريقة العرض :

عزل الكبد الجذعية الوسيطة من أجنة البط في المختبر-كولاجيناز جنبا إلى جنب مع عملية الهضم تم إعدادها .5س10سالخلايا/زجاجة .

اختبار الجودة :

الكبد الخلالي من أجنة البطCD44المناعي تحديد نقاء90%أعلاه ، لا تحتوي علىفيروس نقص المناعة البشرية - 1وفيروس HBVوفيروس HCVالميكوبلازما ، البكتيريا والخميرة والفطريات .

معلومات التدريب :

متوسطة الثقافة : تحتوي علىFBSوصندوق EGFوbFGFوالبنيسيلينوستريبتوميسينانتظر

السائل تغيير التردد : في2-3تغيير السوائل مرة واحدة في اليوم

خصائص النمو : لصق

مورفولوجيا الخلايا الليفية مثل

خصائص الإرسال3-5جيل حول

عصارة هضمية1 ف - 4

حالة ثقافة : بخار المرحلة : هواء ,95%نثاني أكسيد الكربون，5%

في المختبر والثقافة فترة بطة الكبد الجذعية الوسيطة محدودة . من أجل ضمان أفضل حالة ثقافة الخلية ، فمن المستحسن أن تستخدم وسائل الإعلام الخاصة و العملية الصحيحة .

خطوات مرور الخلية :

إذا كانت كثافة الخلية تصل إلى 80 ٪ - 90 ٪ ، يمكن أن تحمل على ثقافة فرعية .
1 - إزالة طاف ، وغسل الخلايا مع برنامج تلفزيوني بدون أيونات الكالسيوم والمغنيسيوم 1-2 مرات .
2 - إضافة 2 مل من السائل الهضمي ( 0.25 في المائة trypsin-0.53mm EDTA ) في الثقافة قارورة ، ووضعها في حاضنة في 37 ℃ لمدة 1-2 دقيقة ، ثم لاحظ تحت المجهر الهضم ، إذا كان معظم الخلايا تصبح مستديرة و تسقط ، بسرعة العودة إلى طاولة العمليات ، اضغط على عدة زجاجات الثقافة ، إضافة كمية صغيرة من وسائل الإعلام لإنهاء عملية الهضم .
3 - الضغط على 6-8ml / زجاجة متوسطة ، برفق فاز وامتصاص ، الطرد المركزي في 1000 دورة في الدقيقة لمدة 4 دقائق ، تجاهل طاف ، إضافة 1-2ml متوسطة ، ثم تهب بالتساوي .
4 - تقسيم تعليق خلية جديدة في طبق أو زجاجة تحتوي على 8 مل متوسطة الثقافة في نسبة 1 : 2 إلى 1 : 5 .

خطوات إنعاش الخلايا :

تجميد الأنابيب التي تحتوي على 1 مل من تعليق خلية هزت وذوبان بسرعة في 37 ℃ حمام مائي ، ثم 4 مل متوسطة الثقافة أضيفت إلى الخليط بالتساوي . بعد الطرد المركزي لمدة 4 دقائق في 1000 دورة في الدقيقة ، supernatants تم التخلص منها ، و 1-2ml متوسطة الثقافة أضيفت إلى الخليط ثم تهب بالتساوي . ثم كل تعليق خلية أضيفت إلى قارورة الثقافة بين عشية وضحاها ( أو تعليق خلية أضيفت إلى 10 سم طبق ، حوالي 8 مل متوسطة الثقافة أضيفت إلى الثقافة بين عشية وضحاها ) . تغيير السوائل في اليوم التالي و فحص كثافة الخلية .

خطوات الحفظ بالتبريد :

عندما تنمو الخلايا في حالة جيدة ، يمكن الحفاظ على الخلايا بالتبريد . أدناه زجاجة T25 على سبيل المثال؛
1 . عندما الخلايا المجمدة ، بعد التخلص من الثقافة المتوسطة ، برنامج تلفزيوني ينظف قاع الزجاجة 1-2 مرات ، ويضيف 1 مل ، بعد أن تصبح الخلايا مستدير و تقشر ، ويضيف 2 مل الثقافة المتوسطة لإنهاء عملية الهضم ، يمكن استخدام خلايا الدم العد لوحة العد العد .
2.1000rpm الطرد المركزي لمدة 5 دقائق لإزالة طاف . تم تعليق المصل مرة أخرى ، إضافة إلى تركيز DMSO النهائي كان 10 ٪ . بعد إضافة DMSO ، مزيج بسرعة ، وفقا لكل 1 مل من الكمية المخصصة في تجميد تخزين الأنابيب ، وإيلاء الاهتمام إلى تحديد تجميد تخزين الأنابيب . عدد الخلايا في الشركة أكبر من 1 × 106 الخلايا المجمدة .
3 - وضع أنبوب التخزين البارد في برنامج التبريد مربع ، في - 80 درجة الثلاجة ، على الأقل 2 ساعة في وقت لاحق في النيتروجين السائل ملء التخزين . سجل موقع التخزين البارد في المرة القادمة .
منتجات الشركة للبيع :

رات البرسيم عامل3 (TFF3)طقم إليسامجموعة TFF3 ELISA

جزيء إشارة الماوس (Smad1) ELISA Kitالماوس جزيء إشارة تنبيغ(سماد1)كاشف عدة

الببتيد المرتبط بالكالسيتونين، CGRPELISAKitالفئران الجين كالسيتونين المتصلة الببتيد(CGRP) PCRكشف عدة

CLIAKitforHABPELISAKitالفئران حمض الهيالورونيك ملزمة البروتين

cysteins الخلوية-7 (كاسباس-7)نشط fluorometric كيت20وقت .

Ratverylateappearingaigen، فلاليساكيتتأخر ظهور مستضد الفئران(VLA)عدة مواصفة :96T / 48T

الماوس للذوبانهاءاختيار عنصر(sE-selectin)كاشف عدة

الماوس للذوبانإندوغلين (ENG / sCD105)كاشف عدة

الماوس محبب انزيمب (Gzms-B)كاشف عدة

الماوس محبب انزيمأ (Gzms-A)كاشف عدة

بروتين كينازجيمجسم مضاد

3إطار القراءة المفتوح ، ORF17جسم مضاد

CST6الماوس المؤتلفسيستاتين E / CST6بروتيناتالبروتين

سيستاتين3 (CST3)المؤتلف البروتينإعادة تركيب السيستاتين 3 (CST3)

CSNK2A2المؤتلف الإنسانCSNK2A2 / CK2A2بروتيناتالبروتين

بروتين CSNK1G2 البشريالمؤتلف الإنسانCSNK1G2بروتينات

KLRC1 بروتين Cynomolgusالمؤتلف القرد كرابNKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1بروتينات(Fc)العلامةو

مستقبلات الأنجيوتنسين الثاني ( النوع الثاني 0.5 الجغرافيا الثاني مستقبلات )مستقبلات الأنجيوتنسين(مستضداتو

بروتين CSNK1G2 البشريالمؤتلف الإنسانCSNK1G2بروتينات

FZD10الماوس المؤتلففريزلد-10 / FZD10بروتينات(Fc)العلامة(Fc)العلامةالبروتين

IL20RB بروتين الفئرانالمؤتلف الفئرانIL20RBبروتينات(Fc)العلامةو

تيكالمؤتلف الإنسانTie2 / CD202b / TEKبروتينات(له و GST)العلامةالبروتين

بطة الكبد الخلايا الجذعية الوسيطةالماوس gelsol البروتين(جيلسولين) إليسا pcrكشف عدة

عامل تخثر الدم البشري XII (F XII) ELISA Kitالرجل الثاني عشر(F)Ⅻوكاشف عدة

Humanpro-غازين-إطلاق الببتيد، ProGRPELISAKitالغاسترين الافراج عن الببتيد السلائف البشرية(ProGRP) PCRكشف عدة

Human20-hydroxyeicosateaenoicacid، 12-HETEعدة حقوق12hydroxicosahexanoic حمض(12-حرارة)عدة مواصفة :96T / 48T

فطرياتوالخميرة الليفي دياز(سيلوبيز)طقم قياس الألوان النشطة20وقت .

الماوس ئيالماوس ئيH (أبو-H)عدة مواصفة :96T / 48T