فيالخلايا البشرية عدة إليسامن المهم اختيار مختلف الظروف التجريبية ، بما في ذلك :

　　

1 ، اختيار الناقل الصلبة : العديد من المواد يمكن أن تستخدم الناقل الصلبة ، مثل البولي فينيل كلورايد ، البوليسترين ، بولي أكريلاميد ، السليلوز ، وهلم جرا . شكل يمكن مقعر لوحة ، أنبوب اختبار ، الخرز ، الخ . في الوقت الحاضر ، 40 حفرة البوليسترين مقعر لوحة تستخدم عادة . بغض النظر عن أي نوع من الناقل ، يمكن فحص قبل الاستخدام : المغلفة مع كمية متساوية من مستضد ، رد فعل تحت نفس الظروف التجريبية ، ومراقبة ما إذا كان رد فعل اللون موحدة لتحديد ما إذا كان الامتزاز جيدة الأداء .

　　

2 ، المغلفة الأجسام المضادة ( أو مستضد ) الاختيار : عندما الأجسام المضادة ( أو مستضد ) كثف على سطح الناقل الصلبة ، ومتطلبات نقاء جيدة ، عموما يتطلب الرقم الهيدروجيني بين 9 ~ 9.6 . الامتزاز درجة الحرارة والوقت وكمية البروتين أيضا بعض التأثير . عموما 4 ℃ استخدام 18-24 ساعة . من الضروري معايرة تركيز البروتين المغلف ، وهذا هو ، في تركيزات مختلفة من البروتين ( 0.1 , 1.0 و 10 ميكروغرام / مل ، وما إلى ذلك ) . اختيار تركيز كبير من قيمة التطوير التنظيمي زوي وانخفاض كمية البروتين زوي . بالنسبة لمعظم البروتينات ، وعادة ما تكون 1-10 ميكروغرام / مل .

　　

3 ، واختيار العمل تركيز الأجسام المضادة انزيم المسمى : أولا ، استخدام الخلايا البشرية مباشرة إليسا كيت معايرة عيار الأولي ( انظر انزيم المسمى الضد ) . ثم يتم تحديد ظروف أخرى أو استخدام " مصفوفة مربعة " ( الطلاء ، عينة مرجعية من العينة التي سيتم اختبارها ، انزيم المسمى الأجسام المضادة تختلف في تخفيف ) معايرة تركيز العمل بدقة في النظام التجريبي الرسمي .

　　

4 ، الركيزة الانزيم والهيدروجين المانحين الاختيار : اختيار المانحين الهيدروجين يتطلب رخيصة وآمنة ، لون رد فعل واضح ، عديم اللون . بعض الجهات المانحة الهيدروجين ( مثل مكتب أمين المظالم ، وما إلى ذلك ) قد تكون مسرطنة ، وينبغي حمايتها . وإذا سمحت الظروف بذلك ، ينبغي أن تستخدم الجهات المانحة غير المسرطنة والحساسة جدا للهيدروجين ، مثل TMB و ABTS ، التي هي حاليا أكثر ارتياحا . بعد فترة من الزمن ، حمض قوي أو قاعدة قوية تضاف إلى إنهاء رد الفعل . الركيزة العامة وقت العمل ينبغي أن تكون 10-30 دقيقة . الركيزة الحل يجب أن تكون طازجة ، ولا سيما إضافة بيروكسيد الهيدروجين قبل الاستخدام .