هذه المجموعة يمكن أن تستخدم فقط في البحث العلمي ، لا يمكن استخدامها في التشخيص الطبي

نباتات( أ )النباتوheptanose-1 , 7-diphosphatase رهوديولا سخاليني( أ )SBPaseو

إليسا كيت

دليل الاستخدام

مبدأ الكشف

إليسا كيت كان يستخدم مزدوج k à ng خطوة واحدة ساندويتش الأسلوب . العينات القياسية ، HRP المسمى k à ng أضيفت إلى micropores المغلفة مع ( قبل sbpase-1 , 7-diphosphatase ) k à ng الجسم . TMB هو تحويلها إلى اللون الأزرق تحت حفز البيروكسيديز ، وأخيرا الأصفر تحت تأثير حمض . هناك علاقة طردية بين عمق اللون و sppase . . . . . . . الامتصاصية ( التطوير التنظيمي ) تم قياس قيمة في 450nm الطول الموجي مع انزيم المسمى الصك .

طريقة جمع ومعالجة وحفظ العينات

المصل : استخدام أنبوب اختبار دون پايروجن و الذيفان الداخلي ، وتجنب أي تهيج الخلايا أثناء العملية . بعد جمع الدم ، 3000 يتحول إلى الطرد المركزي لمدة 10 دقائق لفصل المصل من خلايا الدم الحمراء بسرعة وبدقة .

2 - البلازما : يدتا ، سيترات أو الهيبارين لمنع تخثر الدم . 3000 دورة في الدقيقة الطرد المركزي لمدة 30 دقيقة .

3 . طاف : 3000 دورة في الدقيقة الطرد المركزي لإزالة الجزيئات والبوليمرات .

4 - خليط الأنسجة : إضافة كمية مناسبة من الملح الطبيعي إلى الأنسجة الهريس . 3000 دورة في الدقيقة الطرد المركزي لمدة 10 دقائق .

5 . التخزين : إذا كان جمع العينات لا يمكن الكشف عنها في الوقت المناسب ، يرجى ملء في وقت واحد ، وتجميد في - 20 ℃ ، وتجنب تكرار التجميد والذوبان ، في درجة حرارة الغرفة ، وضمان أن العينة متحللة بالتساوي .

البنود الخاصة

1 - جهاز وضع العلامات ( 450 نانومتر )

2 . عالية الدقة تغذية عينة بندقية رئيس : 0.5-10ul 2-20ul , 20-200ul , 200-1000ul

3 - 37 ℃ ترموستاتي

الاحتياطات التشغيلية

1 . الحفاظ على عدة في 2-8 ℃ لمدة 20 دقيقة مع درجة حرارة الغرفة الأمامية . تركيز سائل الغسيل من الثلاجة يمكن أن تبلور ، الذي هو ظاهرة طبيعية ، حمام الماء الساخن حتى أن بلورة وان حل تماما قبل استخدامها .

2 - لوحات لا تستخدم في التجربة يجب أن توضع في أكياس مختومة على الفور ، مختومة ( انخفاض درجة حرارة التجفيف ) التخزين .

3 . S0 القياسية مع تركيز 0 يمكن أن تعتبر سلبية أو فارغة . عينة مخففة خمس مرات كما هو موضح في التعليمات ، والنتيجة النهائية هي مضروبة في خمس مرات من العينة الفعلية التركيز .

4 . بدقة وفقا للوقت المحدد في التعليمات ، إضافة كمية السائل و تسلسل الحارة العملية .

5 - يهز جميع مكونات السائل جيدا قبل الاستخدام .

تكوين عدة

ملاحظة : تركيز معيار ( s0-s5 ) 0 , 6.25 , 12.5 , 25 , 50 , 100 ش / مل ، على التوالي .

إعداد الكواشف

تخفيف 20 × غسل العازلة : الماء المقطر المخفف من 1 : 20 ، وهذا هو ، 20 × غسل العازلة بالإضافة إلى 19 أجزاء من الماء المقطر .

طريقة غسل المجلس

1 . دليل غسل المجلس : رمي السائل في حفرة ، ملء كل حفرة مع سائل الغسيل ، لا تزال قائمة لمدة 1 دقيقة بعد رمي السائل في حفرة ، ورقة ماصة على بات الجافة ، حتى غسل المجلس 5 مرات .

2 . التلقائي آلة الغسيل : 350 ميكرولتر من محلول التنظيف يتم حقنها في كل حفرة ، ينقع لمدة 1 دقيقة ، وغسل لوحة 5 مرات .

خطوات التشغيل

1 . إزالة اللوح من احباط الالومنيوم كيس بعد 20 دقيقة من التوازن في درجة حرارة الغرفة .

2 . وضع معيار ثقب ثقب عينة ، إضافة 50 ميكرولتر مع تركيزات مختلفة .

3 - إضافة 10 ميكرولتر من العينة ، ثم 40 ميكرولتر من العينة المخفف . ثقب فارغ لا تضيف .

4 - إضافة هورس راديش پراكسيداز ( HRP ) المسمى k à ng 100 ميكرولتر في كل حفرة من ثقب العينة القياسية باستثناء ثقب فارغة ، وختم رد فعل حفرة مع لوحة الختم الفيلم .

5 - التخلص من السائل ، ورقة ماصة بات الجافة ، كل حفرة مليئة سائل الغسيل ، يقف لمدة 1 دقيقة ، ورمي بعيدا سائل الغسيل ، ورقة ماصة بات الجافة ، حتى تكرار غسل المجلس 5 مرات ( كما يمكن استخدام آلة غسل غسل المجلس ) .

6 - ركائز أ و ب أضيفت 50 ميكرولتر في كل مسام و حضنت في 37 ℃ لمدة 15 دقيقة .

7 - التطوير التنظيمي قيمة كل حفرة في 450nm الطول الموجي في غضون 15 دقيقة بعد 50 ميكرولتر من إنهاء السائل المضافة في كل حفرة .

نتيجة الحكم

رسم منحنى القياسية : في إكسل ورقة العمل ، وذلك باستخدام معيار تركيز المنتج الإحداثي السيني ، المقابلة التطوير التنظيمي قيمة الإحداثي الطولي ، رسم منحنى الانحدار الخطي من معيار المنتج ، وحساب تركيز كل عينة حسب منحنى المعادلة .

أداء عدة

1 - دقة : قيمة معامل الارتباط بين الانحدار الخطي و التركيزات المتوقعة من المعيار هو أكثر من أو يساوي 0.9900 . . . . . . .

2 . حساسية : انخفاض تركيز الكشف أقل من 0.1 ش / مل .

خصوصية : لا عبر التفاعل مع غيرها من نظائرها الهيكلية القابلة للذوبان .

4 - التكرار : معامل الاختلاف بين لوحات أقل من 15 في المائة .

5 . التخزين : 2-8 ℃ ، وتجنب الضوء والرطوبة التخزين .

6 - مدة الصلاحية : 6 أشهر

تنويه

1 . مجموعات البحث فقط ، لا تستخدم في التجارب السريرية أو التجارب البشرية ، وإلا فإن جميع العواقب المترتبة على ذلك ، فإن الشركة ليست مسؤولة .

2 - تعمل بدقة وفقا للتعليمات ، المجرب ينتهك تعليمات التشغيل ، فإن النتائج التي يتحملها المجرب .