تحسين تجربة إليسا للحد من الضوضاء الخلفية هو المفتاح لضمان دقة البيانات . من خلال الجمع بين التجربة ، ونحن نقدم بعض الاقتراحات من أجل التحسين من إغلاق ، والغسيل ، اختيار الأجسام المضادة .

حالة مغلقة الأمثل

الإغلاق هو خطوة أساسية في الحد من غير ملزمة ، مع إيلاء الاهتمام إلى النقاط التالية :

اختيار مانع التسرب : 5 ٪ پادتن ضدسرم آلبومین گاوی ( جيش صرب البوسنة ) أو مسحوق الحليب الخالي من الدسم تستخدم عادة ، جيش صرب البوسنة هو مناسبة لمعظم الحالات ، لا سيما إذا كانت العينة تحتوي على تركيزات عالية من الدهون أو انحلال الدم ، جيش صرب البوسنة ينبغي أن تعطى الأولوية لتجنب التدخل . إذا كان الكشف عن البروتين الفسفرة ، تجنب استخدام الحليب الخالي من الدسم تحتوي على الكازين .

ختم الوقت ودرجة الحرارة : عادة ما تكون مغلقة في درجة حرارة الغرفة لمدة 30 دقيقة إلى 2 ساعة ، أو بين عشية وضحاها في 4 ℃ لتحسين التوحيد . 37 ℃ يمكن تسريع رد الفعل ، ولكن ينبغي الحرص على تجنب التبخر .

ختم السائل إعداد : يجب أن تستخدم في الوقت الحاضر ، وتجنب تكرار التجميد والذوبان يؤدي إلى الفشل .

تحسين عملية الغسيل

غسل كامل هو المفتاح للحد من الخلفية :

برنامج تلفزيوني عازلة تحتوي على 0.05 في المائة tween-20 يوصى لإزالة المواد غير الملزمة .

عدد مرات الغسيل و الوقت : من المستحسن أن يغسل 3-5 مرات ، 2-3 دقائق في كل مرة ، لضمان إزالة بقايا الكاشف .

الأجسام المضادة والكواشف الأمثل

نوعية الأجسام المضادة : اختيار واحد أو اثنين من الأجسام المضادة مع خصوصية عالية ، وتحسين تخفيف مرات الحضانة الوقت وتجنب رد فعل الصليب .

تطوير السيطرة : ضبط تركيز ووقت تطوير كاشف بعقلانية ، وتجنب الإفراط في تطوير يؤدي إلى ارتفاع الخلفية .

اعتبارات أخرى

تحميل البروتين : ضمان جودة البروتين محملة بشكل صحيح ، وتجنب الإفراط في التحميل مما يؤدي إلى غير محددة ملزمة .

البيئة التجريبية : تجنب الضوء الساطع ، لا سيما في مرحلة تطوير اللون والكشف .